产品介绍：

伊文思蓝(Evans Blue)又称偶氮蓝，分子式C34H24N6Na4O14S4，分子量为960.80，CAS号为314-13-6伊文思蓝与台盼蓝都是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性和细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。活细胞因有外排功能而无法被伊文思蓝染色，因此可以通过此方法在显微镜下区分死细胞与活细胞，但无法区分死亡与坏死。

本品为2x伊文思蓝染液，用时可根据实验需要配置成适当浓度。

储存条件:

2-8°C，避光保存。

使用说明（仅供参考）：

1. 血脑屏障通透性：

a. 取处理后的实验动物(以小鼠为例)，静脉注射稀释好的0.5%伊文思蓝染液，小鼠眼睛、皮肤出现蓝色。0.5～1h后处死小鼠，取目的脑组织。

b. 脑组织置于1.5ml离心管中，加入1ml PBS， 迅速用组织匀浆器将脑组织制成匀浆, 离心。

c. 取上清，加入等量三氯乙酸，4℃孵育。该步骤亦可采用如下操作: 取上清，按上清:丙酮=3:7比例加入丙酮，室温孵育24h。

d. 离心15min。

e. 取上述溶液，用分光光度计测620 nm处吸光值(OD值)。同时测定已知不同梯度的标准依文思蓝的OD值，绘制标准曲线。根据标准曲线计算出待测待测样品的依文思蓝含量。

2. 活细胞染色：

a. 取100μl重悬细胞到常规离心管内，入100μl 稀释好的0.5%伊文思蓝染液轻轻混匀染色(染色时间可适当延长，但不宜超过10min)。

b. 吸取少量经过染色后的细胞，用血细胞计数板计数。通常如果要比较精确地进行定量，每个细胞样品至少数500个细胞，数出蓝色细胞和细胞总数。细胞存活率计算公式如下:

细胞存活率＝(细胞总数－蓝色细胞数)/细胞总数×100%

注意事项：

1. Evans Blue Stain对人体有轻微毒性，请小心防护。

2. 细胞染色时，注意凋亡小体偶尔也有拒染现象。

3. 血脑屏障通透性实验中，Evans Blue Stain注射量应根据不同动物以及动物的重量调整。

4. 最好采用低温冷冻离心机进行离心。

5. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品在文章中的写法：

英文： Dowobio （Shanghai，China）

中文： 上海多沃生物科技有限公司  Dowobio，上海