产品包装:
产品编号
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产品名称
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包装
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保存温度
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DW2102-A
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细胞固定液
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100ml
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4度
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DW2102-B
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封闭液
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6ml
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-20度
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DW2102-C
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DyLight 549, Goat Anti Rat IgG
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100ul
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-20度
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DW2102-D
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抗体稀释液(一抗 二抗)
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10ml
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4度
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DW2102-E
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细胞核染色液
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5ml
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-20度
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DW2102-F
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抗荧光淬灭封片液
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5ml
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-20度
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DW2102-G
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PBS粉
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1L
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常温
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DW2102-H
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盖玻片
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24*50
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常温
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自备试剂及耗材:
吸头/吸水纸/一抗/离心管
实验步骤:
a. PBS配制: 取出G号试剂,加入1L双蒸水,溶解即可,后面实验清洗均匀这个试剂,后面步骤均用G代替。
b. 取出做好的爬片/准备好的细胞,用加入1ml G液洗2-3次。
c. 加1ml A液,室温置放30分钟,后去掉液体,用G液洗2-3次。
d. 滴1-2滴B液,室温孵育30分钟。注意:液体的量要覆盖细胞。
e. 用吸水纸吸掉B液,加入自己准备的一抗,室温孵育1-2小时;一抗可用D液稀释。此步骤加的液体一定要全覆盖标本。
f. 用G液洗标本3次,每次浸泡3-5分钟。
g. 准备1个离心管,取2ul C液加入到200ul D液中混匀,该剂量为4-6张8mm爬片的量,请自己根据标本的数量和大小自动调整,用量即为液体覆盖到标本即可。
h. 用吸水纸吸掉第6步清洗后的液体;注意:每次吸液体,吸水纸只能在细胞边缘。
i. 加20-50ul第7步配制的液体,室温孵育60分钟。用量自己可以调整,液体覆盖到标本即可。
j. 用G液洗3次,每次3-5分钟。
k. 用吸水纸吸干多余的液体,加入2-3滴E液,染色5分钟。
l. 用G液洗3次,每次3-5分钟。
m. 吸水纸吸干多余的液体,加2-3滴F液体。用盖玻片封片。
n. 及时拍照,如果不能拍照,建议放4度冰箱。
所用荧光激发和接收波长:
①DyLight 549是一种黄红色荧光团(显微镜下红色),其最大吸收波长在555nm,相应的最大发射波长是568nm。
②E为细胞核染料,是一种蓝色,其最大吸收波长在358nm,相应的最大发射波长是461nm。
染色结果:
红色为目的蛋白;蓝色为细胞核。
注意事项:
1.本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品在文章中的写法:
英文: Dowobio (Shanghai,China)
中文: 上海多沃生物科技有限公司 Dowobio,上海