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商品名称:
含DAPI的抗荧光淬灭封片剂
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商品编号:
MI110
蓝色荧光DAPI常用于细胞核染色,优先与双链DNA结合,可与小沟中的AT结合。DAPI与双链DNA结合后,由于DAPI和小沟中的水分子被置换,可产生20倍的荧光强度。DAPI亦可与RNA结合,但结合的模式不同。DAPI/RNA复合体与DAPI/DNA复合体相比,发射波长较长(前者约500nm,后者约460nm)。在多色荧光染色技术中,DAPI也是较常用的核复染剂。其蓝色荧光可与绿色、黄色或红色荧光形成鲜明的对比。DAPI可特异性的染核,几乎不标记细胞质。
产品包装:
产品编号
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产品内容
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包装规格
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MI110
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含DAPI的抗荧光淬灭封片剂
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5mL
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说明书
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1份
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MI110-5
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含DAPI的抗荧光淬灭封片剂
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25mL
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说明书
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1份
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产品简介:
蓝色荧光DAPI常用于细胞核染色,优先与双链DNA结合,可与小沟中的AT结合。DAPI与双链DNA结合后,由于DAPI和小沟中的水分子被置换,可产生20倍的荧光强度。DAPI亦可与RNA结合,但结合的模式不同。DAPI/RNA复合体与DAPI/DNA复合体相比,发射波长较长(前者约500nm,后者约460nm)。在多色荧光染色技术中,DAPI也是较常用的核复染剂。其蓝色荧光可与绿色、黄色或红色荧光形成鲜明的对比。DAPI可特异性的染核,几乎不标记细胞质。
抗荧光淬灭封片液是一种用于减缓荧光淬灭的封片试剂。可以用于减缓各种常见荧光染料的荧光淬灭。
该试剂盒中DAPI的浓度为0.4µg/mL。
保存条件:
-20°C避光保存,一年内有效。
操作流程:
1 贴壁细胞的复染
1.1样品准备
1.1.1使用恰当的固定剂固定样品。一般情况下,最后用DAPI对细胞进行染色。
1.2复染流程
1.2.1 用PBS短暂平衡样品;
1.2.2 加入适量的DAPI染液,保证所有细胞均被覆盖,孵育3~5min,加盖片;
1.2.3用配有恰当滤片的荧光显微镜观察样品。
2 悬浮细胞的复染
2.1样品准备
2.2.1 收集悬浮细胞2×105~1×106个细胞,通过离心,使细胞沉淀,弃上清;
2.2.2 轻弹试管,使沉淀在剩余的液体中重悬,在加入1mL PBS;
2.2.3 将细胞悬液缓慢的加入4mL乙醇中,同时以最大的速度涡旋。将含有细胞的乙醇在-20°C放置5~15min;
2.2.4 通过离心,使细胞沉淀,弃上清;
2.2.5 轻弹试管,使沉淀松散,在加入5ml PBS。
2.2复染流程
2.2.1 离心使细胞沉淀,弃上清,轻弹试管,使沉淀松散,加入2~3mL DAPI染液;
2.2.2 室温下孵育15min;
2.2.3 在显微镜载片上滴加一滴细胞悬液,加盖片后,使用荧光显微镜观察细胞观察。
注意事项:
1 荧光物质均易发生淬灭,染色后的样品宜避光保存。在使用抗淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭,但仍宜尽量避光。
2 它是流动性较好的封片液,在封片后盖玻片和载玻片不会完全粘结,但不会影响常规的荧光观察。如希望把盖玻片和载玻片粘结在一起,可在盖玻片的四周用指甲油进行封闭和粘结。
3 第一次使用本试剂盒时建议先取1~2个样品做预实验。
温馨提示:
为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,带手套等。