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产品介绍：

油红O染色试剂盒也称脂肪染色试剂盒，是一种通过油红O染料特 异性地使培养的脂肪细胞中的脂滴或组织内的甘油三脂等中性脂质染成红色或橙红色的试剂盒。本试剂盒适用于细胞、组 织冰冻切片、骨髓涂片或血涂片等样品，但不适合用于石蜡切片样品。

使用说明（仅供参考）：

1. 样品处理：

a. 对于细胞：

①缓慢吸去细胞培养液，PBS洗涤1次。

注：对于贴壁不太好的细胞，加入任何溶液时，不宜直接将溶液加到细胞上，而应沿着孔板壁缓慢加入，然后轻轻混匀，这样可以避免将在加入溶液时使细胞漂浮起来。

②加入固定液固定10min，PBS漂洗2次。

b. 对于冰冻切片：

取出预制好并保存于-20ºC的冰冻切片，放入切片架回温5-10min。

c. 对于骨髓涂片和血涂片：

①取少许样品置于载玻片上，将推玻片与载玻片保持30°角，用推玻片来回将骨髓推匀于玻片表面，最好制稍厚一点的涂片。将涂片在空气中自然干燥或吹干。

②选做：用固定液固定10min，固定后PBS漂洗2次。

2. 油红O染色工作液的配置

饱和油红O原液按3:2（油红O：蒸馏水）加入蒸馏水，混匀，室温放置5-10min，过滤后使用。

注：该工作液现配现用，2h内使用最佳，不可以过夜。

3. 油红O染色。

a. 对于细胞：

①加入适量洗涤液覆盖细胞20秒。

②吸除洗涤液，加入适量油红O染色工作液，染色10-20min。

注1：染液体积均匀覆盖细胞即可，以6孔板为例，可加入1ml染色工作液。

注2：可适当延长染色时间，但不要超过1小时。

①去除油红O染色工作液，加入适量洗涤液，静置30秒，然后去除洗涤液，用蒸馏水洗涤20秒。

②选做：可用苏木素染色液进行细胞核的复染，染色3-5min，蒸馏水漂洗。

③加入适量PBS，均匀覆盖细胞即可，显微镜下观察和拍照。

b. 对于冰冻切片、骨髓涂片和血涂片：

①加入适量洗涤液覆盖样品20秒。

②吸除洗涤液，用蒸馏水稍清洗。

③将配制好的油红O染色工作液滴加于切片上，或直接将切片浸入染色工作液中，密闭染色10-20min。

注：可适当延长染色时间，但不宜超过1小时。

④去除油红O染色工作液，将适量洗涤液滴加于切片上，静置30秒，然后去除洗涤液，浸入蒸馏水中置于摇床洗涤20秒。

⑤选做：可用苏木素染色液进行细胞核的复染，染色3-5min，蒸馏水漂洗。

⑥染色完成后可以直接观察和配制。也可以使用水性封片液封片，推荐使用Dowobio的抗荧光淬灭封片液，然后镜下观察和拍照。

注意事项：

1. 第一次使用本试剂时建议先取1-2个样本做预实验。

2. 油红O溶液是饱和溶液，室温或4ºC保存时，可能会有少量沉淀析出或瓶壁有少量不溶物粘附，不影响使用。

3. 油红O染色时，应避免染色工作液挥发，否则染色工作液可能会形成沉淀而产生背景。

4. 油红O染色结果不能长期保存，染色完毕后应尽快观察拍照。

5. 样品固定时请使用4%多聚甲醛固定液，不可用醇类或丙酮等可以溶解脂肪的固定液。

6. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品。

7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

本产品在文章中的写法：

英文： Dowobio （Shanghai，China）

中文： 上海多沃生物科技有限公司  Dowobio，上海