商品名称:
2×Taq Plus PCR MasterMix
商品编号:
MI020105，MI020106
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂以及稳定剂，浓度为2×。
2×Taq Plus PCR MasterMix
产品及特点
本产品包含Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂以及稳定剂，浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度地减少人为误差。它具有下列特点：
1.显著提高PCR反应的特异性和灵敏度，还能有效扩增GC含量高、二级结构等复杂模板。
2.多次冻融或长期放于4℃不会影响活性；
3.应用简便，减少误差，降低了对PCR条件的要求；
4.含染料的MasterMix产品在PCR结束后可以直接上样电泳。
成分规格
目录号
产品名称
包装
MI020105-1
2×Taq Plus PCR MasterMix
（含染料）
1 ml
MI020105-5
5×1 ml
MI020106-1
2×Taq Plus PCR MasterMix
（不含染料）
1 ml
MI020106-5
5×1 ml
-20℃可保存12个月。
使用方法
（注意：以下举例为常规PCR体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的调整和优化）
1.PCR体系
推荐反应体系（25μl）
试剂
用量
模板 DNA
< 1μg
Primer 1 (10 μM)
0.5 μl
Primer 2 (10 μM)
0.5 μl
2×Taq Plus PCR MasterMix
12.5 μl
ddH2 O
Up to 25 μl
（注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0 uM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系）
2.PCR程序
过程
温度
时间
预变性
94℃
2 min
25 ~ 35 cycles
变性
94℃
30 sec
退火
55-65 ℃
30 sec
延伸
72 ℃
1kb/30 sec
终延伸
72℃
2 min
（注意：a一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。b延伸时间应根据所扩增片段大小设定，Taq DNA Polymerase的扩增效率为1 kb/30 sec。c可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以，在保证产物得率的前提下，应尽量减少循环次数）
3.结果检测：反应结束后取5μl反应产物，加入适量上样缓冲液（含染料的不用加），然后进行琼脂糖凝胶电泳检测。
