产品简介
Transfection Reagent（线性化聚乙烯亚胺转染试剂），是一种以线性化聚乙烯亚胺为主体、分子量为40000的高电荷阳离子聚合物，其本身带正电，可以有效的结合带负电的核酸，与之形成复合物，并导入到细胞中，适用于细胞的质粒DNA转染。转染试剂（线性化聚乙烯亚胺）细胞毒性低，转染效率高且成本低，相较于脂质体类转染试剂，性价比极高。目前已经验证线性转染试剂广泛适用于多种细胞系包括HEK-293、HEK293T、CHO-K1、COS-1、COS-7、NIH/3T3、Sf9、HepG2和Hela细胞等，转染效率高达80%~90%。
储存与运输
冰袋（wet ice）运输；4℃保存，有效期至少6个月；长期不用可-20℃保存更长时间，避免反复冻融。
操作步骤
1.贴壁细胞转染前准备工作（6孔板为例，其他规格参考附表）：
a)转染前一天，将细胞以合适的密度均匀种植于孔板中，以正式转染时细胞汇聚至70-85%为宜；
b)转染前，去除原细胞培养基，用PBS清洗1-2次后，更换1.8 mL不含血清或者低血清（5%以下）的基础培养基，或Opti-MEM；不同细胞对于血清依赖性不同，根据具体细胞种类调整。
c)将换好液的细胞放置于培养箱中，并开始配制转染复合物。
2.悬浮细胞转染前准备工作：
a)转染当天，将适量的细胞，离心去除培养基后，用不含血清或者低血清（5%以下）的基础培养基重悬；
b)将准备好的悬浮细胞放置到培养箱中，并开始配制转染复合物，转染复合物和培养基之间的体积比，可以参考贴壁细胞的比值，进行适当调整。
3.转染复合物准备：
a)配制A液：100μL不含血清的基础培养基与2μg质粒DNA，吹吸混匀；
b)配制B液：100μL不含血清的基础培养基与6-8μL Transfection Reagent，吹吸混均；
c)将B液加到A液中，轻轻吹打混均，室温孵育15 min，使其形成DNA-ransfection Reagent转染复合物。
4.转染细胞：
a)将上一步得到的转染复合物，以画十字或者环绕的方式，滴加到之前换好液的孔板中；
b)手持孔板在平面上画“8”字或其他的方式轻摇培养板，使其混合充分，置于37℃，5%CO2培养箱中孵育；
c)DNA-ransfection Reagent转染复合物与细胞共同孵育4-6 h即有较好的转染效率，适当延长或过夜孵育，转染效率更佳。
注意事项
1.请使用状态良好的健康细胞，复苏的细胞建议至少传代2次后再进行转染。
2.请使用高质量、无内毒素的质粒DNA。
3.转染时高浓度血清以及抗生素的使用，可能会影响细胞状态以及转染效率。
4.不同的细胞耐受性、敏感性不一样，转染孵育时间长短，以及PEI/DNA使用比例，可视情况酌情调整。
5.操作时请穿实验服，佩戴一次性手套。
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培养器皿
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生长面积（cm2）
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接种细胞数
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DNA量（μg）
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转染试剂（μL）
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转染复合物体积（μL）
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总体积（mL）
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96孔板
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0.3
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(2-4)×104
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0.1
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0.3-0.4
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10
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0.1
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24孔板
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1.9
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(1.2-2.4)×105
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0.5-1
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1.5-4
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50
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0.5
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12孔板
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3.8
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(2.4-4.8)×105
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1月2日
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3月8日
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100
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1
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6孔板
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9.5
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(6-10)×105
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2月4日
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6月16日
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200
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2
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10 cm培养皿
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55
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(4-6)×106
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12月24日
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36-96
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1000
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12
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T75培养瓶
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75
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(6-10)×106
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18-36
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54-144
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1000
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15
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附表：不同细胞培养容器转染使用量（仅供参考）
本产品仅供科研用途，不用于临床诊断！
