MI Lipo3000 转染试剂是基于脂质体颗粒技术的转染试剂，能够高效地与DNA或RNA形成复合物，并将复合物运送到各种各样的贴壁细胞和悬浮细胞中。
产品及特点
MI Lipo3000转染试剂是基于脂质体颗粒技术的转染试剂，能够高效地与DNA或RNA形成复合物，并将复合物运送到各种各样的贴壁细胞和悬浮细胞中。此试剂具有优异的转染效率，并可提高细胞活性，广泛适用于难转染的及常见的细胞种类。经过无数次试验验证，MILipo3000的转染效率与Lipofectamine®3000相媲美，并且在有血清存在的条件下，也可以实现对真核细胞的DNA或RNA的转染实验。本产品具有以下特点：
1.高转染效率，对于较难转染的细胞种类，试用本产品转染效率尤为突出。
2.无需去除细胞培养基中的血清。
3.转染后，无需换液。
4.对细胞作用温和，毒性很低。
5.同时适用于DNA、RNA及共转染应用。
成分规格
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产品组成 |
MI30015 |
MI30008 |
MI30003 |
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MI Lipo3000 试剂 (组分A) |
1.5 mL |
0.75 mL |
0.3 mL |
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Enhancer Reagent (组分B) |
1.5 mL |
0.75 mL |
0.3 mL |
保存条件
4℃储存（切勿冷冻），有效期两年。
使用方法
以下指导实验步骤为利用24孔板在哺乳动物细胞中转染DNA。其他转染需求，请参考扩大或缩小转染规模操作步骤。每种反应混合物体积为单个孔的体积，且考虑移液误差。
1.贴壁细胞:转染前一天，接种0.5-2×105细胞，培养基体积500μl，不加抗生素，使转染时细胞汇合度达到70-90%。
悬浮细胞:在转染之前，准备复合物，接种4-8×105细胞，培养基体积为500μl，不加抗生素。
2.每次转染前，请按照以下步骤制备转染复合物：
a)使用前，轻轻晃动混匀MI Lipo3000试剂(组分A),然后在25μl Opti-MEM®培养基加入1μl MILipo3000试剂。充分混匀，室温孵育。
b)在25μl Opti-MEM®培养基（可替换为其他无血清培养基）中加入0.5μg DNA，然后加入1μl Enhancer试剂(组分B)。充分混匀，室温孵育。
c)将步骤a和b制得的液体按照1:1的比例混合即得到转染复合物，总体积为50μl，充分混匀，室温下孵育10-15分钟。
3.取上述转染复合物50μl加入含有细胞的培养基中，晃动24孔板轻轻混匀。
4.37°C孵育细胞2-4天即可分析转染细胞。转染完4-6小时后可更换培养基。
DNA转染优化方案
为达到高转染效率和低细胞毒性的最佳效果，可以对DNA和转染试剂的比例及转染初始细胞密度进行优化。比如要确保细胞在转染时汇合度大于90%，DNA(μg):MILipo3000试剂(μl):Enhancer试剂(μl)的比值在1:1:2到1:4:2范围内。
扩大或减小转染规模
使用下表扩大或减少转染实验的体积，规格系数如下表所示
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培养容器 |
培养表面积 (cm2) |
培养基体积 |
稀释培养基体积 |
DNA 转染 |
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DNA |
MI Lipo 3000试剂 |
Enhancer 试剂 |
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96孔 |
0.3 |
100 µl |
2 × 5 µl |
0.1 µg |
0.15~0.3 µl |
0.2 µl |
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48孔 |
1 |
250 µl |
2 × 12.5 µl |
0.25 µg |
0.25~0.5 µl |
0.5 µl |
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24孔 |
2 |
500 µl |
2 × 25 µl |
0.5 µg |
0.75~1.5 µl |
1 µl |
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12孔 |
4 |
1 ml |
2 × 50 µl |
1.0 µg |
1.5~3.0 µl |
2 µl |
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