核酸染料可以与DNA分子特异性的结合，细胞周期检测中PI最为常用。

• 一、细胞周期检测的原理

  核酸染料可以与DNA分子特异性的结合，细胞周期检测中PI最为常用。PI为插入性核酸荧光染料，能选择性的嵌入核酸DNA和RNA双链螺旋的碱基之间与之结合，其结合的量与DNA的含量成正比例关系，用流式细胞仪进行分析，就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态，从而计算出各个期的百分含量。

  二、实验试剂和材料

  1．PI

  400μg/mL，PI溶于水，4℃避光保存。

  2．RNase试剂

  配制成1mg/ml ，RNase溶于PBS，分装，-20℃保存。

  三、实验操作步骤

  1. 收集待检测细胞，用2ml PBS重悬，1000r/min离心5min，弃上清。细胞数要求每组1×106个细胞。

  2. 加入1ml PBS和2ml无水乙醇，重悬，用封口膜封口。4℃下可保存1h至15d。

  3. 将待检测样品，1000r/min离心5min，弃固定液，再用2ml PBS，1000r/min离心5min，洗涤2次。弃上清，用400μl PBS重悬细胞。

  4. 加入50μl的PI和50μl的RNase，室温避光孵育30min。

  5. 上流式细胞仪检测。

  四、 实验结果分析

  实验结果如下图所示：

  

  注：第一个峰为GO/G1期，中间峰为S期，最后一个峰为G2/M期